李记生物“EZ细胞高效转染试剂”使用方法是什么

1、（以 24 孔板为例）为例

2、1. 接种细胞

对于贴壁细胞，转染前 18-24 h 进行铺板（不含抗生素），使其在转染时的密度大约在 80%左右。对于悬浮细胞，转染当天，配制 EZ Trans-DNA 复合物之前进行铺板，每 500 µL 生长培养基中加入 4~8×105cells。

【注】：培养液中的血清不影响转染效率。转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

3、2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物 

(1) 对于每孔细胞，将 1 μg 质粒 DNA 稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基（或者 OPTI-MEM Ⅰ 培养基），混匀。(2) 对于每孔细胞，将 3 μL EZ Trans 转染试剂稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基（或者 OPTI-MEMⅠ 培养基），轻轻混匀。【注】：无血清的高糖 DMEM 培养基是稀释液，不能使用含血清的培养基进行 DNA 和 EZ Trans 转染试剂的稀释。因为 EZ Trans-DNA 转染复合物的形成过程不能含有血清。(3) 将稀释好的 EZ Trans 转染试剂尽快全部加入到已稀释好的质粒 DNA 中，轻轻混匀。【注】：此混合的顺序不能反向进行。(4) 室温放置 10-15 min，以形成 EZ Trans-DNA 复合物

4、3. 转染细胞 

(1) 将上述 80 μL EZ Trans-DNA 转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿或轻微振荡，让 EZ Trans-DNA 复合物分散均匀。(2) 在 37℃，5% CO2培养箱培养 6-18 h，去除含 EZ Trans-DNA 复合物的培养液，更换新的培养液，继续培养至对转入基因表达分析。 

【注】：筛选稳定转染细胞株，转染细胞 24 h 后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释 10 倍以上），在 37℃，5% CO2培养箱中孵育 24 h，加入筛选培养基。在有转染抗性基因相匹配的药物筛选条件下，约 1～2 周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

5、以上就是李记生物“EZ细胞高效转染试剂”的操作步骤了，感兴趣的小伙伴可以购买试试哦，效果不错的。