细胞转染时遭遇细胞污染怎么办?
1、将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。
2)继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。
3)继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。
4)重复步骤3再洗。
5)重复步骤3再洗
2、加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
7)加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
8)再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。
3、加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培
养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机
800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入
2ml双抗。
10)24h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,
若看不到污染物,则继续步骤1)、3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗.
11)24h之后,若仍污染严重,可再重复一次,若还污染只能弃之(不过一般
没有出现这种情况),若镜下不见污染物,则换液PBS洗瓶,正常培养。
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