微生物dna提取方法

2025-10-10 23:23:04

1、分离核酸的一般性原则有:

1. 保持核酸一级结构的完整性。

2. 防止其他物质的污染。

2、核酸纯化应达到的原则:

1. 防止其他生物大分子比如蛋白质的污染。

2. 防止其他核酸分子的污染,例如RNA或来自非样品微生物的DNA以及RNA。

3. 保持最后得到的核酸溶液内低重金属离子的含量。

4. 保持核酸溶液低有机溶剂污染。

3、一般流程:

1. 破碎细胞;

2. 核酸提取;

3. 纯化。

4、常用酶类:

Dnase;

Rnase。

5、必备试剂:

1. 细胞破碎剂;

2. 核酸沉淀剂;

3. 乙醇。

1、快速抽提法:

所用试剂少,步骤简略,实验时间较短。

微生物dna提取方法

2、蛋白酶/SDS法:

实验室最常用简略方法。

微生物dna提取方法

3、酚/氯仿/异戊醇抽提法:

可先配置三种试剂的master mix再进行实验

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4、Standard DNA extraxtion protocol:

Most mature and standard protocol.

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5、标准DNA提取方法:

实验室最常用,同时也是最标准且被认可的试验方法,SDS裂解细胞同时有蛋白酶消除蛋白污染。

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