微生物dna提取方法
1、分离核酸的一般性原则有:
1. 保持核酸一级结构的完整性。
2. 防止其他物质的污染。
2、核酸纯化应达到的原则:
1. 防止其他生物大分子比如蛋白质的污染。
2. 防止其他核酸分子的污染,例如RNA或来自非样品微生物的DNA以及RNA。
3. 保持最后得到的核酸溶液内低重金属离子的含量。
4. 保持核酸溶液低有机溶剂污染。
3、一般流程:
1. 破碎细胞;
2. 核酸提取;
3. 纯化。
4、常用酶类:
Dnase;
Rnase。
5、必备试剂:
1. 细胞破碎剂;
2. 核酸沉淀剂;
3. 乙醇。
1、快速抽提法:
所用试剂少,步骤简略,实验时间较短。

2、蛋白酶/SDS法:
实验室最常用简略方法。

3、酚/氯仿/异戊醇抽提法:
可先配置三种试剂的master mix再进行实验

4、Standard DNA extraxtion protocol:
Most mature and standard protocol.


5、标准DNA提取方法:
实验室最常用,同时也是最标准且被认可的试验方法,SDS裂解细胞同时有蛋白酶消除蛋白污染。

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