怎样HE染色:[2]各步骤应注意问题
关于染苏木素。染色时间其实不用控制那么细的,染色的快慢与配置的染液的着色力有关,染色力越强,染色时间可适当缩短,反之,染色力越低,染色时间相对较长;同时,苏木素上色还与外界温度及接触时间有关,外界温度越高,染色越快,接触时间越长,染色越深。
关于分化。首先要搞清楚分化的目的,其目的是为了去掉组织中过染的染料,使颜色对比和细胞背景更加的清晰。但是分化不能过度,因为酸能破坏苏木素的结构,使色素与组织分离。
关于脱水。对于含水量大的组织可从较低浓度开始,例如30%,40%的乙醇都可以,这样可以防止细胞过度皱缩。同时,在进入下一级乙醇时,要用滤纸将多余的乙醇吸干。最最重要的一点是严格控制时间。
关于透明这步。之前的脱水那步一定要彻底。因为二甲苯无法进入仍含有水的组织结构中。而且,透明时间不能过长,如果过长的话切片时组织易碎裂。
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