饲料中钙的测定

1、一． 适应范围：

本法适用配合饲料和单一饲料。

二． 原理：

将试样中有机物破坏钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺 乙二胺 盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响。在碱性溶液中以钙黄素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液络合滴定钙，以EDTA溶液消耗的体积即为钙的含量。

三． 试剂和溶液：

本标准中所用试剂除特殊要求外，均为分析纯。试验用水应为蒸馏水或等纯度水。

1. 硝酸

2. 高氯酸

3. 盐酸羟胺

4. 盐酸溶液（1：3）溶液

5. 氢氧化钾水溶液20%

6. 三乙醇胺水溶液（1：1）

7. 乙二胺水溶液（1：1）

8. 淀粉溶液(10g/L):称取1g可溶性淀粉加 入200ml,加5ml水润湿，加95ml沸水搅匀煮沸现用现配。

9. 孔雀石绿水溶液：1g/l

10. 钙黄素-甲基百里香酚蓝指示剂：0.1g钙黄绿素和0.12g甲基百里香酚蓝，5g氯化钾研细摇匀。贮存于磨口瓶中备用。

四． 仪器与设备：

1. 实验室用样品粉碎机或研钵。

2. 分样筛：孔径0.45mm（40目）。

3. 分析天平：分度值0.0001g。

4. 高温炉：可控制炉温在550±20℃。

5. 坩埚：瓷质，容积50ml。

6. 凯式烧瓶：150ml。

7. 可调小电炉：1000W。

8. 容量瓶：100ml.

9. 滴定管：酸式25ml。

10. 移液管：1ml.

11. 量杯：10ml;20ml.

12. 锥形瓶：150ml。

五． 试样的选取和制备：

取具有代表性试样，用四分法缩减至50g，粉碎至40目。

六． 测定步骤：

1. 试样的分解：

⑴． 干法：用于有机物质。称取2.5g试样，准确至0.0002g，在电炉上小火炭化，在炭化过程中，应将试样在较低温度状态加热灼烧至无烟，然后升温灼烧至样品无炭粒，再放入高温炉中于550±20℃下灼烧3小时，取出，在空气中冷却后，加入1：3的盐酸10ml和浓硝酸4滴，小火煮沸，将此溶液转入容量瓶，定容，即为试样分解液。

⑵． 湿法：用于无机物质。称取磷酸氢钙0.4g，其它试样称取1.0g于凯式烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸10ml、高氯酸10ml，盖上弯颈漏斗，加热煮沸10min，冷却后加蒸馏水20ml，煮沸5min，驱逐二氧化氮，冷却后转入容量瓶，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即为试样分解液。

2. 试样的测定：

准确移取试样分解液1ml于锥形瓶中，加水50ml，加淀粉溶解液10ml，三乙醇胺2ml，乙二胺1ml，1滴孔雀石绿，氢氧化钾10ml，0.1g盐酸羟胺，加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。

七． 测定结果计算与表达：

1.计算：

Ca（%）=T×(V₂－V₁)×100/m

式中：T—EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/ml;

V₁--滴定空白时所用标准液的体积（ml）；

V₂--试样实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积（ml）；

m—试样的质量（g）。

2.重复性：每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。含钙量在5%以上时，允许相对偏差3%；含钙量1%-5%时，允许相对偏差5%；含钙量1%以下时，允许相对偏差10%。